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C-Papers (16)

2014
  • 1. 不同浓度苯并(a)芘对杂色鲍抗氧化酶活性的影响. 应用海洋学学报, 2014, 4
  • 2. 甲壳动物促雄腺激素功能、生化和分子结构的研究. 水产科学, 2014, 5
  • 3. NF-κB信号通路在鱼类先天性免疫中的作用. 生物技术通报, 2014, 1
2011
  • 1. 海洋鱼类和青蟹抗菌肽hepcidin和scygonadin的研究. 厦门大学学报(自然科学版), 2011, 2
2010
  • 1. 苯并[a]芘(BaP)对真鲷细胞色素P450和芳香烃受体基因表达的影响. 中山大学学报(自然科学版), 2010, 3
2009
  • 1. 苯并(a)芘影响黑鲷肝脏EROD活性变化的动力学研究 . 海洋科学 , 2009, 1
  • 2. 坏死梭杆菌白细胞毒素基因SH片段的克隆与表达 . 特产研究 , 2009, 1
  • 3. 食源性致病菌六联融合毒素的构建及免疫学特性研究 . 现代预防医学 , 2009, 6
  • 4. 黑鲷抗菌肽hepcidin在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性 . 厦门大学学报(自然科学版) , 2009, 5
  • 5. 鲍免疫相关基因和蛋白的研究进展 . 遗传 , 2009, 4
2008
  • 1. 锯缘青蟹抗菌肽Scygonadin基因的转录表达特性研究. 厦门大学学报(自然科学版), 2008, 06
  • 2. 细菌攻毒杂色鲍血淋巴细胞抑制性差减杂交文库构建及巨噬细胞表达蛋白cDNA的克隆与差异表达. 遗传, 2008, 08
  • 3. 坏死梭杆菌FN(A)型毒力株保护性抗原筛选及初步鉴定. 畜牧兽医学报, 2008, 07
2007
  • 1. 坏死梭杆菌白细胞毒素基因BSBSE片段的克隆及原核表达. 吉林农业大学学报, 2007, 05
  • 2. 尼罗罗非鱼Hepcidin基因结构与序列分析. 厦门大学学报(自然科学版), 2007, 03
  • 3. 花鲈肝脏hepcidin相关cDNA Hepc2的克隆及序列分析. 中国生态农业学报, 2007, 03



Patents (13)

  • 1. 一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法
  • 【Application Number】
  • CN201110386427.6
  • 【Application Date】
  • 2011-11-28
  • 【Patent Number】
  • CN102433341B
  • 【Publication Date】
  • 2014-02-26
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 曲海东; 陈贝
  • 【Abstract】
  • 一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法,涉及生物技术领域中的鱼类基因工程表达。提供一种斜带石斑鱼抗菌肽的原核表达产物及其制备方法。构建的含有EC-hepcidin3基因的表达载体可在大肠杆菌中诱导表达,并通过高效纯化表达产物而在体外获得大量的表达产品。含有EC-hepcidin3基因的表达载体是在原核表达载体pET-28a+中插入EC-hepcidin3前体肽基因序列所构成的重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3。在体外获得的表达产物,是重组表达载体pET28a/EC-hepcidin3在大肠杆菌中经诱导表达以及纯化后获得的重组蛋白EC-proHep3。
  • 2. 拟穴青蟹阴离子抗菌肽的毕赤酵母表达产物及其制备方法
  • 【Application Number】
  • CN201110250662.0
  • 【Application Date】
  • 2011-08-29
  • 【Patent Number】
  • CN102304516B
  • 【Publication Date】
  • 2013-11-13
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 彭会; 曲海东
  • 【Abstract】
  • 拟穴青蟹阴离子抗菌肽的毕赤酵母表达产物及其制备方法,涉及拟穴青蟹抗菌肽的基因工程表达。构建拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin的重组表达载体;将所得重组表达载体导入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化所得的表达产物,获得重组蛋白,即拟穴青蟹阴离子抗菌肽Scygonadin。借助基因工程技术,利用pPIC9K毕赤酵母表达载体,表达出具有抗菌活性的拟穴青蟹抗菌肽Scygonadin,该重组蛋白具有广谱的抗菌活性,抗菌活性与从雄性拟穴青蟹性腺中直接获得的Scygonadin纯品的抗菌结果相似。Scygonadin的基因工程表达产品将在抗病原微生物新药和动物饲料添加剂中应用。
  • 3. 拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子及其制备方法与应用
  • 【Application Number】
  • CN201110327329.5
  • 【Application Date】
  • 2011-10-25
  • 【Patent Number】
  • CN102352363B
  • 【Publication Date】
  • 2013-07-24
  • 【Inventors】
  • 刘海鹏; 陈荣元; 王克坚
  • 【Abstract】
  • 拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子及其制备方法与应用,涉及一种抗病毒型抗脂多糖因子。提供拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2的基因序列、氨基酸序列、拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2的制备方法以及拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子的应用。构建拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2重组表达载体;将重组表达载体导入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化后产物,获得重组蛋白,即Sp-ALF2。所述拟穴青蟹抗病毒型抗脂多糖因子Sp-ALF2对WSSV和多种病原菌具有明显抑制作用和杀伤作用,在制备抗病新药和作为动物抗病饲料添加剂中具有广泛应用价值。
  • 4. 两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法
  • 【Application Number】
  • CN201110250681.3
  • 【Application Date】
  • 2011-08-29
  • 【Patent Number】
  • CN102304536B
  • 【Publication Date】
  • 2013-04-17
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 彭会; 陈贝
  • 【Abstract】
  • 两种海洋动物抗菌肽基因的真核融合表达产物及制备方法,涉及海洋鱼类与蟹类抗菌肽的基因工程表达。两种海洋动物抗菌肽基因包括拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因、连接肽和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因。分别PCR扩增拟穴青蟹抗菌肽scygonadin基因和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因,重叠PCR法获得联合多肽Scy-hepc的目的基因片段;将所得的融合基因Scy-hepc导入表达载体,构建携带融合基因Scy-hepc的重组表达载体;将所得的重组表达载体转入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化所得的表达产物,获得重组蛋白,即联合多肽Scy-hepc。
  • 5. 一种拟穴青蟹抗菌肽Sphistin及其应用
  • 【Application Number】
  • CN201110129015.4
  • 【Application Date】
  • 2011-05-17
  • 【Patent Number】
  • CN102167736B
  • 【Publication Date】
  • 2013-03-27
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 范丹青; 蔡灵
  • 【Abstract】
  • 一种拟穴青蟹抗菌肽Sphistin及其应用。涉及甲壳类动物基因工程技术领域,提供一种拟穴青蟹抗菌肽Sphistin及其应用。所述拟穴青蟹抗菌肽Sphistin的分子式为C170H293N61O46S1,分子量为3959.61道尔顿。由38个氨基酸组成,来源于拟穴青蟹组蛋白Histone?2A蛋白的N端部分序列,是一种具有抗菌功能的多肽。采用现有的固相化学合成的方法即可获得纯度达95%以上拟穴青蟹抗菌肽Sphistin。所述拟穴青蟹抗菌肽Sphistin对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌有显著的抗菌效果,抗菌谱宽、杀菌速率快,显示出极大的医用价值,在制备抗菌剂方面具有良好的应用。
  • 6. 一种大黄鱼hepcidin抗菌肽及其制备方法
  • 【Application Number】
  • CN201010505548.3
  • 【Application Date】
  • 2010-10-13
  • 【Patent Number】
  • CN101974082B
  • 【Publication Date】
  • 2013-01-02
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 蔡灵; 蔡晶晶
  • 【Abstract】
  • 一种大黄鱼hepcidin抗菌肽及其制备方法。涉及生物技术领域中的鱼类基因工程,提供一种大黄鱼hepcidin抗菌肽及其制备方法。所述大黄鱼hepcidin抗菌肽的制备方法包括:克隆大黄鱼hepcidin抗菌肽基因,构建重组载体,转化宿主细胞,挑选阳性克隆进行原核表达,分离纯化表达产物,获得大黄鱼hepcidin抗菌肽。分离纯化时提高了蛋自的得率,解决了大黄鱼hepcidin抗菌肽表达复性时会有蛋自析出的间题。所用的溶液,配置简单,价格低廉。制备的大黄鱼hepcidin抗菌肽具有很高的广谱抗菌活性,不仅可用于科研,而且可以作为饲料添加剂用于海水养殖鱼类的疾病防治,具有广阔的应用前景。
  • 7. 两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物及其表达方法
  • 【Application Number】
  • CN201010225669.2
  • 【Application Date】
  • 2010-07-09
  • 【Patent Number】
  • CN101906165B
  • 【Publication Date】
  • 2012-11-14
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 丁建; 蔡晶晶
  • 【Abstract】
  • 两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物及其表达方法,涉及一种海洋生物的基因工程技术。提供两种鱼类抗菌肽基因的串联表达产物以及两种鱼类Hepcidin串联表达载体的构建和串联表达产物的制备方法。通过pET32a原核表达载体串联表达两种鱼类hepcidin基因,实现两种抗菌肽hepcidin同时可溶性表达,两种串联抗菌肽表达量超过50mg/L,可溶性串联表达产物通过N末端His-Tag亲和层析纯化后,再以肠激酶切除串联蛋白标签,切后混合物再经Ni亲和层析柱,获得纯化的Hepcidin串联表达产物。纯化表达产物对金色葡萄球菌、嗜水单胞气菌,溶壁微球菌等均有显著的抑制作用。
  • 8. 拟穴青蟹抗脂多糖因子及其制备方法与应用
  • 【Application Number】
  • CN201110127379.9
  • 【Application Date】
  • 2011-05-17
  • 【Patent Number】
  • CN102212124B
  • 【Publication Date】
  • 2012-07-18
  • 【Inventors】
  • 刘海鹏; 陈荣元; 丁建; 王克坚
  • 【Abstract】
  • 拟穴青蟹抗脂多糖因子及其制备方法与应用。涉及拟穴青蟹基因工程,提供拟穴青蟹抗脂多糖因子及其制备方法与应用。制备方法包括以下步骤:构建拟穴青蟹抗脂多糖因子重组表达载体;将所得重组表达载体导入宿主细胞,并将宿主细胞进行诱导表达,获得表达产物;分离纯化步所得的表达产物,获得重组蛋白,即拟穴青蟹抗脂多糖因子。拟穴青蟹抗脂多糖因子对革兰氏阴性菌弗氏志贺氏菌、解藻朊酸弧菌、副溶血性弧菌、施氏假单胞菌和荧光假单胞菌,革兰氏阳性菌谷氨酸棒杆菌具有明显抑制生长作用和杀菌作用,在制备抑菌药和作为动物饲料抗菌添加剂中具有潜在的应用价值。
  • 9. 两种海洋动物抗菌肽基因的融合表达产物及其制备方法
  • 【Application Number】
  • CN201010562466.2
  • 【Application Date】
  • 2010-11-26
  • 【Patent Number】
  • CN102061303B
  • 【Publication Date】
  • 2012-07-04
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 黄晟沛; 蔡晶晶
  • 【Abstract】
  • 两种海洋动物抗菌肽基因的融合表达产物及其制备方法。涉及生物技术领域中鱼类与蟹类的基因工程,提供两种海洋动物抗菌肽基因的融合表达产物及其制备方法。融合表达产物的基因包括锯缘青蟹抗菌肽scygonadin2基因、连接肽和大黄鱼抗菌肽hepcidin基因。制备方法包括:克隆融合基因scygonadin2-hepcidin;表达融合基因scygonadin2-hepcidin,即得两种海洋动物抗菌肽基因的融合表达产物。利用pET28a原核表达载体,成功高效的表达出具有抗菌活性的锯缘青蟹抗菌肽scygonadin2与大黄鱼抗菌肽hepcidin的融合表达产物,使得串联抗菌肽的药用价值得到开发。
  • 10. 黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体和表达产物及其构建制备方法
  • 【Application Number】
  • CN200710008862.9
  • 【Application Date】
  • 2007-04-20
  • 【Patent Number】
  • CN101063145B
  • 【Publication Date】
  • 2010-04-14
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 杨明; 蔡晶晶
  • 【Abstract】
  • 黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体和表达产物及其构建制备方法,涉及一种可高效表达黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体的构建与表达。黑鲷抗菌肽Hepcidin的表达载体是在含有E.coli?Trc启动子、蛋白质工程改造过的CKS基因及组氨酸标签(His-Tag)的原核表达载体pTrc-CKS上连接黑鲷Hepcidin基因所构建成的pTrc-CKS/hepcidin表达质粒,具有P3C酶切割位点,C末端融合6个组氨酸。其融合表达产物CKS-hepcidin可通过C末端His-Tag亲和层析纯化,纯化的融合产物可用P3C酶将融合蛋白中的CKS切除,获得纯化的Hepcidin。
  • 11. 锯缘青蟹抗菌肽及其基因和基因的克隆方法
  • 【Application Number】
  • CN200510053239.6
  • 【Application Date】
  • 2005-02-17
  • 【Patent Number】
  • CN1325515C
  • 【Publication Date】
  • 2007-07-11
  • 【Inventors】
  • 王克坚; 黄文树; 李少菁; 王桂忠
  • 【Abstract】
  • 锯缘青蟹抗菌肽及其基因和基因的克隆方法,涉及一种抗菌活性多肽scygonadin及其基因。从锯缘青蟹雄性腺中分离纯化得抗菌肽scygonadin,并以锯缘青蟹的雄性腺总RNA为模板,根据测定的scygonadin抗菌肽N端20个氨基酸序列,设计合成简并引物,利用RT-PCR、RACE等分子生物学技术手段,克隆到锯缘青蟹抗菌肽scygonadin全长cDNA基因序列。该基因可通过构建真核表达载体建立高效表达该抗菌肽的基因工程菌株,体外生产抗菌肽,作为饲料免疫添加剂替代传统饲料中的抗生素,也可以作为抗生素的有效替代品,用于水产养殖业中耐药性细菌的防治药物。另外,还可以用于转基因青蟹的育种研究。
  • 12. 亚热带海水网箱养鱼区富营养化的生物修复方法
  • 【Application Number】
  • CN200410006587.3
  • 【Application Date】
  • 2004-03-11
  • 【Patent Number】
  • CN1255335C
  • 【Publication Date】
  • 2006-05-10
  • 【Inventors】
  • 焦念志; 梁红星; 汤坤贤; 方少华; 徐永健; 钱鲁闽; 袁东星; 洪华生; 林亚森; 游秀萍; 王克坚; 沈东煜; 陈敏儿; 林泗彬; 王永胜; 王海洲; 魏艳; 王春光; 林丽玉
  • 【Abstract】
  • 亚热带海水网箱养鱼区富营养化的生物修复方法,涉及一种海菜的栽培,尤其是在网箱附近或网箱中的水培,用于亚热带海水网箱养鱼区富营养化的生物修复。其步骤为选择藻种并放养在海水中,初始放养的生物量密度小于800kg/亩;在密度大于1000kg/亩后采收,采收后的生物量密度小于600kg/亩。生物修复吊养筏架设有至少2根并排设置的支杆,支杆的端部由绳索或支架联接成架体,支杆之间设有系绳,架体上设有至少1个悬浮体,架体通过至少4根固定绳索固定。将海藻栽培与网箱养鱼相结合进行混养,用于海水养殖富营养化的生物修复,用简单的方法、很低的成本显著地缓解了海水养殖富营养化,有效地解决了长期以来悬而未决的生态环境问题,具有突出的生态效益、社会效益和经济效益。
  • 13. 亚热带养殖池塘富营养化的生物修复方法
  • 【Application Number】
  • CN200410006588.8
  • 【Application Date】
  • 2004-03-11
  • 【Patent Number】
  • CN1255336C
  • 【Publication Date】
  • 2006-05-10
  • 【Inventors】
  • 焦念志; 梁红星; 汤坤贤; 方少华; 徐永健; 钱鲁闽; 袁东星; 洪华生; 林亚森; 游秀萍; 王克坚; 沈东煜; 陈敏儿; 林泗彬; 王永胜; 王海洲; 魏艳; 王春光; 林丽玉
  • 【Abstract】
  • 亚热带养殖池塘富营养化的生物修复方法,涉及一种海藻的栽培,尤其是在筏架上的水培,用于亚热带池塘富营养化生物修复的方法。其步骤为选择生物修复植物并吊养在筏架上,起始吊养密度小于300kg/亩;采收后的苗绳回补种苗,养殖密度小于600kg/亩。筏架设有至少3根并排设置的支杆,支杆的端部由绳索或支架联接成架体,支杆间设系绳,架体上设至少2个悬浮体,架体通过至少4根固定绳索固定。可采用不同的修复生物,实现全年不间断修复。可通过连接筏架上支杆的塑料泡沫体的绳子长度任意调节筏架的水下深度,适用不同透明度的池塘养殖水体。采用的间绳收获与补苗方法,保持水体中随时有适量的修复生物。实用性强,操作简便、易于推广。

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